凝胶迁移实验(EMSA)
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实验原理
基于蛋白-探针复合物在凝胶电泳过程中的迁移速率,当核酸探针与蛋白样本混合孵育时,样本中可以与核酸探针结合的蛋白质与探针形成蛋白-探针复合物,这种复合物由于分子量大,在进行PAGE电泳时迁移较慢,而没有结合蛋白的探针则迁移较快。孵育的样本在进行PAGE电泳并转膜后,蛋白-探针复合物会在膜靠前的位置形成一条带,说明有蛋白与目标探针发生互作。
应用
这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,也可应用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
案例展示
参考文献:1. Modrzejewska, M.; Kawalek, A.; Bartosik, A.A. The Lrp/AsnC-Type Regulator PA2577 Controls the EamA-like Transporter Gene PA2576 in Pseudomonas aeruginosa. Int. J. Mol. Sci. 2021, 22, 13340. https://doi.org/10.3390/ijms222413340
2. Yang B, Song Z, Li C, Jiang J, Zhou Y, Wang R, et al. (2018) RSM1, an Arabidopsis MYB protein, interacts with HY5/HYH to modulate seed germination and seedling development in response to abscisic acid and salinity. PLoS Genet 14(12):e1007839. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1007839